Teste imunológico para detecção de antígenos de superfície do vírus da Hepatite B: uma estratégia promissora para desenvolvimento de insumo para diagnóstico

Resumo

O vírus da Hepatite B (HBV) pertence à família Hepadnaviridae, caracterizado pela presença
de DNA envelopado e capacidade de infectar as células hepáticas. De acordo com o Ministério
da Saúde, no período de 1999 a 2020 foram notificados em todo o Brasil 514.678 casos
confirmados de hepatite virais, caracterizando um problema de saúde pública. Pesquisas na
área da virologia e produção biotecnológica têm usado como alternativa a expressão de genes
heterólogos em sistema eucarioto, como por exemplo, do sistema de expressão utilizando
baculovírus que infecta células de inseto para expressar proteínas heterólogas. Sendo assim,
o presente trabalho propôs analisar a expressão do antígeno de superfície do vírus da hepatite
B (HBV) em sistema eucarioto verificando a possível viabilidade em desenvolver um produto
biotecnológico, uma vez que o HBsAg (antígeno de superfície do vírus da hepatite B) tem um
papel fundamental no diagnóstico e prevenção da hepatite B. Para isso, uma estratégia de
dna recombinante foi construída, fusionando o antígeno HBsAg junto a proteína específica do
baculovírus, e assim, permitir uma boa expressão desse antígeno. Com a expressão correta
da proteína recombinante foi possível quantificá-la por meio do Quant-iT, e foram realizados
testes sorológicos imunoenzimáticos, o ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)
indireto, método que se baseia na interação antígeno-anticorpo. As concentrações estavam
de acordo com o esperado e para o teste ELISA, utilizamos soro de pacientes que tiveram
contato com os vírus da hepatite B, ou hepatite C ou citomegalovírus (CMV) em relação ao
antígeno construído pelo sistema do Baculovírus. Isso se deu para verificar possíveis reações
cruzadas entre esses vírus. Foi possível observar pelos testes sorológicos que há necessidade
de uma melhor padronização da técnica e das amostras, pois a característica de reações
cruzadas ficou inconclusivo. Por ser um antígeno marcador sorológico indicativo de infecção
pelo HBV, assim como, o único componente da vacina contra o HBV, a estratégia utilizada é
promissora visto que foi possível obter a proteína heteróloga expressa com sucesso.
Atualmente, não existem indústrias ou empresas nacionais que produzam em larga escala o
HBsAg, necessitando importar vacinas e kits para diagnóstico. Portanto, há a necessidade de
uma melhor padronização do teste sorológico aplicado para verificar a validade e
confiabilidade estatística do experimento. Contudo, sabemos que as hepatites virais são um
grave problema de saúde pública no Brasil e no mundo, e necessitam de mais pesquisas,
visando melhorar as formas de prevenção, diagnóstico e tratamento.